汉防己甲素干预HIF-1α/PD-1/PD-L1轴抑制口腔鳞癌侵袭潜能的机制研究

作者：彭坷平; 田桂湘^*; 彭书旺; 宾东华; 左巧娟; 谭焱; 谢海清

来源：湖南中医药大学学报, 2023, 43(11): 1971-1977.

• 汉防己甲素
• 口腔鳞癌
• 缺氧诱导因子-1α
• 程序性细胞死亡蛋白1
• 程序性细胞死亡蛋白1配体
• 侵袭

目的 探讨汉防己甲素（tetrandrine, TET）对口腔鳞癌（oral squamous cell carcinoma, OSCC）细胞侵袭潜能的影响及其相关机制。方法 将OSCC细胞随机分为4组：对照组（不加药物处理）、低剂量组（10μmol/L TET）、中剂量组（20μmol/L TET）、高剂量组（30μmol/L TET）。采用MTT法、划痕实验和Transwell实验分别测定各组细胞的活力、迁移及侵袭能力。对OSCC细胞分别转染缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)、程序性细胞死亡蛋白1(programmed cell death protein 1, PD-1)及程序性细胞死亡蛋白1配体（programmed cell death ligand 1, PD-L1）模拟物及抑制剂，均连续转染24 h。采用RT-qPCR检测正常口腔上皮细胞、OSCC细胞以及转染HIF-1α、PD-1、PD-L1模拟物及抑制剂OSCC细胞中HIF-1α、PD-1、PD-L1 mRNA表达水平。通过Western blot检测各组细胞中纤维连接蛋白（Fibronectin）、波形蛋白（Vimentin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、HIF-1α、PD-1以及PD-L1蛋白表达水平。结果 与对照组相比，低、中、高剂量组细胞活力、迁移及侵袭能力均被显著抑制（P<0.05）,HIF-1α、PD-1、PD-L1m RNA显著上调（P<0.05）,Fibronectin、Vimentin、HIF-1α、PD-1、PD-L1蛋白水平随剂量增加逐渐下降（P<0.05）,E-cadherin蛋白水平随剂量增加逐渐上升（P<0.05）。转染HIF-1α模拟物细胞的HIF-1α相对表达量及穿膜细胞数高于转染HIF-1α抑制剂细胞（P<0.05），转染PD-1模拟物细胞的PD-1相对表达量及穿膜细胞数高于转染PD-1抑制剂细胞（P<0.05），转染PD-L1模拟物细胞的PD-L1相对表达量及穿膜细胞数高于转染PD-L1抑制剂细胞（P<0.05）。结论 TET可能通过抑制HIF-1α/PD-1/PD-L1轴，从而抑制OSCC细胞活力、迁移及侵袭能力，有望作为辅助治疗OSCC的新药。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院; 中南大学湘雅二医院