小鼠Rig-Ⅰ蛋白的原核表达、纯化及其抗体制备

作者：陈磊; 李咸洋; 奚绪光

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2009, (08): 6-12.

DOI：10.13207/j.cnki.jnwafu.2009.08.007

• 小鼠
• 维甲酸诱导基因Ⅰ(Rig-Ⅰ)
• 原核表达
• 抗体制备 Mus musculus
• retinoic acid-induced gene Ⅰ
• prokaryotic expression
• antibody preparation

【目的】进一步研究小鼠维甲酸诱导基因Ⅰ(Rig-Ⅰ)蛋白的细胞信号传导、结构与功能。【方法】利用已经构建好的逆转录病毒载体MigRI-Rig-Ⅰ,用PCR方法扩增出小鼠Rig-Ⅰ基因氨基端100 bp长度的片断(Rig-Ⅰ-N),将此片段定向克隆到原核表达载体pGEX-4T2中,构建pGEX-4T2-Rig-Ⅰ-N,再将Rig-Ⅰ基因剩余部分克隆到已构建有Rig-Ⅰ-N部分片段的pGEX-4T2-Rig-Ⅰ-N中,构建融合表达载体pGEX-4T2-Rig-Ⅰ,将其转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,对表达产物GST-Rig-Ⅰ融合蛋白进行纯化,制备抗体,并对抗体效价进行ELISA检测及抗...

• 单位
  西北农林科技大学; 上海交通大学医学院附属瑞金医院