人14-3-3γ基因转移对帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用

作者：陈小武; 陈志斌; 王埮; 王淑荣; 蔡美华; 孙圣刚

来源：中华老年医学杂志, 2012, (11): 1022-1026.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-9026.2012.11.029

• 14-3-3蛋白类
• 基因疗法
• 基因转移技术
• 帕金森病

目的探讨14-3-3γ转基因疗法对帕金森病模型大鼠的治疗作用及可能机制。方法用携带人14-3-3γ基因的重组腺病毒(Ad)感染帕金森病大鼠模型纹状体后,采用免疫组化方法检测纹状体与黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达、免疫印迹技术检测Caspase-3及14-3-3γ蛋白的表达、高效液相色谱法检测纹状体DA及其代谢产物DOPAC含量变化,并对PD大鼠的旋转行为进行评分。结果 Ad/14-3-3γ注射PD大鼠纹状体后14-3-3γmRNA及蛋白均能过表达。Ad/14-3-3γ组黑质TH免疫反应阳性的细胞数和纹状体TH免疫反应阳性的神经纤维光密度值与正常对照侧的比值(0.47±0.12和0.61±0.14)显著高于PBS组(0.16±0.13和0.25±0.12)和LacZ组(0.15±0.09和0.27±0.11)(均P<0.01)。Ad/14-3-3γ组注射侧大鼠纹状体区DA含量与对侧比值为0.37±0.14,显著高于PBS组(0.15±0.08,P=0.006)和LacZ组(0.19±0.11,P=0.007);其代谢产物DOPAC含量与对侧比值Ad/14-3-3γ组(0.34±0.12)也高于对照组(PBS组为0.13±0.10,LacZ组为0.16±0.09,均P=0.00)。Ad/14-3-3γ组注射侧纹状体中Caspase-3的表达与对侧相比显著降低。行为学评估结果显示Ad/14-3-3γ组大鼠平均旋转次数在第2次注射后的第1周、第2周和第6周均低于PBS组和LacZ组(均P<0.01);而PBS组和LacZ组相比,两组的旋转次数在上述三个时间点均差异无统计学意义(P=0.764,0.779和0.742)。结论 14-3-3γ对PD模型大鼠的多巴胺能神经元有保护作用,是PD基因治疗中非常有前景的候选基因。

• 单位
  华中科技大学; 神经内科; 海南医学院附属医院; 协和医院