结核分枝杆菌PhoP/PhoR基因重组穿梭表达质粒的构建及鉴定

作者:梁晨; 姜晓霞; 张锋; 王霞; 吴芳; 章乐; 吴江东; 张春军; 张辉; 樊超; 庄睿; 李文娟; 张万江
来源:石河子大学学报(自然科学版), 2013, (06): 697-701.
DOI:10.13880/j.cnki.65-1174/n.2013.06.005

摘要

为构建结核杆菌PhoPR双组分系统PhoP、PhoR基因的重组穿梭质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR并对其进行鉴定。采用结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA为模版,利用PCR技术分别扩增PhoP、PhoR基因编码序列,先克隆于T-Vector pMD19(Simple),再亚克隆至大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV361,并转化E.coli DH5α感受态细胞,提取所得的阳性克隆子获得重组表达质粒pMV361-PhoP、pMV361-PhoR,通过PCR及双酶切鉴定。结果显示,结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株基因组DNA中扩增出的PhoP、PhoR基因...

  • 单位
    新疆医科大学第五附属医院; 新疆阿克苏地区第二人民医院; 石河子大学医学院第一附属医院; 石河子大学

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