基于EGFR的抗肺腺癌中药筛选及其体外作用研究

作者：余悦华; 赵岩; 卢天公; 孙震晓^*

来源：中国药物警戒, 2023, 20(07): 735-741.

DOI：10.19803/j.1672-8629.20230273

• 肺腺癌
• 表皮生长因子受体
• 分子对接
• 连翘
• 知母总皂苷
• 线粒体膜电位
• 细胞凋亡

目的 基于肺腺癌特异性靶点表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)，利用TCMSP数据库及分子对接技术虚拟筛选出可能具有抗肺腺癌作用的中药或中药部位，并探究其体外抗肺腺癌作用及机制。方法 将TCMSP数据库中经过类药和吸收-分布-代谢-排泄(absorption-distribution-metabolism-excretion,ADME)筛选的中药小分子化合物与EGFRL858R/T790M/C797S突变体进行分子对接，虚拟筛选出可能具有抗肺腺癌作用的中药或中药部位；MTT法进行初步的抗肺腺癌活性验证和体外筛选，根据对人肺腺癌细胞NCI-H1975与人肺成纤维细胞HPF的区别细胞毒作用进一步筛选出潜在的抗肺腺癌中药或中药部位；流式细胞术检测潜在抗肺腺癌中药或中药部位对NCI-H1975细胞凋亡及线粒体膜电位的影响；Western印迹法检测连翘提取物和知母总皂苷对于EGFR及其下游靶点AKT的蛋白表达及磷酸化的影响。结果 虚拟筛选出候选抗肺腺癌中药8味(肉豆蔻、连翘、百部、半边莲、郁金、荜茇、玉竹、知母)和中药部位3个(百部生物碱、知母总皂苷、绞股蓝总皂苷)；体外实验研究发现，知母、连翘提取物及百部生物碱、知母总皂苷对人肺腺癌细胞NCI-H1975细胞毒作用较强，作用呈一定时间和剂量依赖性；同等剂量下连翘提取物和知母总皂苷对HPF的细胞毒作用较弱，对人肺腺癌和肺成纤维细胞具有一定区别作用，进一步研究发现，其能诱导NCI-H1975线粒体膜电位下降及细胞凋亡并抑制EGFR-PI3K/AKT信号通路的活化。结论 基于肺腺癌特异靶点，利用中药及中药成分数据库通过分子对接等手段可以虚拟筛选抗肺腺癌中药或中药部位，通过体外实验进一步筛选对肺腺癌及肺正常细胞有区别作用的中药或中药部位，并揭示其作用机制。

• 单位
  生命科学学院; 北京中医药大学