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摘要
目的:为研究非酒精性脂肪肝(NAFLD)的发病机制以及潜在候选药物疗效，构建人脂肪酸转运蛋白5(hFATP5)在肝脏过表达的转基因小鼠模型。方法:将hFATP5表达序列插入白蛋白启动子的下游，构建基因表达载体，C57BL/6小鼠的受精卵通过显微注射、胚胎移植，繁殖过表达hFATP5(hFATP5+)小鼠。通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法确认hFATP5的过表达。稳定传代和扩繁后，对hFATP5+小鼠与野生型小鼠进行4周的高脂饲料喂养，检测血清甘油三酯、总胆固醇，肝脏甘油三酯，行腹腔注射糖耐量实验。结果:hFATP5+小鼠的F1、F2代和C57BL/6野生型小鼠比较，hFATP5+小鼠hFATP5蛋白质和信使核糖核酸水平在心、肝、脾、肾、肺、肠、胃组织显著过表达。4周高脂喂养后，hFATP5+雄性小鼠的体质量、血总胆固醇、肝内甘油三酯含量均显著高于野生型雄性小鼠，且糖耐量显著较差，而雌性小鼠之间的相关指标未出现显著差异。结论:hFATP5+雄性小鼠在肝脏过表达hFATP5,获得FATP5半人源化小鼠模型，4周高脂饲养形成更显著的代谢综合征和NAFLD。FATP5转运过多长链脂肪酸入肝是NAFLD发生的关键因素之一。
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