人诱骗受体3酶联免疫定量检测方法的建立

作者：伍兵; 陈纬; 王锃; 陈龙; 陈锦容; 吴海平; 吴尚毅; 汪宽福; 张美; 张震寰; 张鲁榕; 张亨山; 林建华

来源：临床检验杂志, 2018, 36(01): 5-8.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2018.01.02

• 人诱骗受体3
• 酶联免疫吸附试验
• 血浆
• 正常值

目的建立检测人诱骗受体3(DcR3)含量的ELISA方法。方法建立固相双抗体夹心法定量检测DcR3:用抗DcR3抗体包被ELISA板,捕捉样本中DcR3,再加入生物素标记的抗DcR3抗体及亲合素标记的辣根过氧化物酶,形成含酶的固相复合物,最后以底物显色,以同板上的标准曲线定量。对所建立的方法进行灵敏度、特异性、精密度、回收率、线性范围及血浆DcR3参考范围的评估。结果所建立方法分析灵敏度为0.051 ng/m L,重复性和期间精密度分别小于10%和15%,平均回收率为90.50%。在包被抗体中加入2倍量抗TNF-α、在检测抗体中加入10倍量生物素标记的抗LIGHT、抗FAS或抗TNF-α或在DcR3标准品中加入10倍量的LIGHT纯蛋白,均不影响标准曲线的状态。检测方法的线性范围为0.2516 ng/m L(r≥0.98)。128例正常成人血浆DcR3的均值为(0.21±0.05)ng/m L,95%可信限参考值范围为0.140.28 ng/m L,无年龄及性别差异。结论所建立的ELISA检测方法具有特异性高、灵敏度、精密度及线性好、可测范围大等特点,可用于检测人血DcR3含量。

• 单位
  福建医科大学附属第一医院