磷酸钙法与脂质体法转染HBV全基因组的比较

作者：李永伟; 卢建溪; 郭云蔚; 陈伟

来源：中国热带医学, 2010, 10(06): 656-657+660.

DOI：10.13604/j.cnki.46-1064/r.2010.06.001

• 磷酸钙转染
• 脂质体转染
• HBV全基因组

目的比较磷酸钙法和脂质体法转染全长HBV基因组的效率及对HBsAg和HBeAg表达的影响。采用真核细胞报告基因SEAP与HBVDNA共转染人肝癌细胞系HepG2。方法分别将带有分泌性碱性磷酸酶(SEAP)报告基因的质粒、表达绿色荧光蛋白的PCI-EFGP质粒与HBVDNA共转染HepG2细胞。培养后48h计数表达绿色荧光蛋白的细胞,收取细胞培养上清,用ELISA法测定SEAP活性,IMX法检测HBV表面抗原和e抗原水平。结果脂质体法转染HBV全基因组的效率明显高于磷酸钙转染法,转染后48h的细胞上清表面抗原和e抗原的表达也明显高于后者。结论脂质体转染法转染HBV的效率较磷酸钙转染法高,抗原表达水平高,是体外研究HBV的较理想方法。

• 单位
  中山大学附属第三医院