幽门螺杆菌毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白表达的影响

作者:鲍丽雅; 黄婷婷; 赵艳; 李超; 陈定宇; 王琴容; 周建奖; 谢渊*
来源:中国病原生物学杂志, 2019, 14(12): 1394-1402.
DOI:10.13350/j.cjpb.191206

摘要

目的检测幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)主要毒力蛋白CagA对胃癌细胞线粒体自噬相关蛋白parkin、p62、LC3表达的影响,为Hp致胃癌的研究提供理论基础。方法用cagA基因失活突变Hp菌株(1004Hp△cagA)和野生型Hp/cagA+菌株(1004Hp)感染原代胃癌细胞,感染6h收集细胞蛋白,用高表达cagA的真核表达载体pcDNA3.1/cagA脂质体转染胃癌细胞AGS,24h收集细胞蛋白,用Western blot检测各组细胞线粒体自噬相关蛋白parkin、p62、LC3表达变化。结果 parkin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在1004 Hp△cagA感染组分别为0.97±0.23、1.71±0.23、1.03±0.14,1004Hp感染组分别为1.61±0.32、2.26±0.08、1.32±0.04,1004Hp感染组较1004Hp△cagA感染组升高了1.66倍、1.32倍、1.27倍,差异有统计学意义(F值分别为7.96、15.35、11.09,P<0.05);parkin、p62、LC3蛋白表达检测灰度值在pcDNA3.1空载体转染组分别为1.15±0.14、0.75±0.23、0.74±0.19,pcDNA3.1/cagA转染组分别为1.49±0.02、1.01±0.02、1.29±0.07,pcDNA3.1/cagA转染组较pcDNA3.1空载体转染组升高1.29倍、1.35倍、1.74倍,差异有统计学意义(F值分别为17.48、14.02、21.06,P<0.05)。Hp/cagA+感染和pcDNA3.1/cagA转染取得一致结果,提示Hp cagA注入胃上皮细胞后影响细胞线粒体自噬相关蛋白的表达。结论Hp CagA对线粒体自噬有一定的调控作用,其可能是Hp诱导胃癌发生发展的分子机制。