三角叶黄连ISSR反应体系的建立与优化

作者：张春平; 何平; 王瑞波; 高姗; 张益锋

来源：中草药, 2009, 40(02): 280-284.

• 三角叶黄连
• ISSR
• 种质资源
• 优化 Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao
• ISSR
• germplasm resource
• optimization

目的针对三角叶黄连ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR-PCR分子标记反应体系,为进一步研究三角叶黄连的种质资源遗传多样性奠定基础。方法通过筛选引物并设定影响三角叶黄连ISSR-PCR反应诸因子的不同梯度,检测其不同反应体系的扩增效果,分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立三角叶黄连ISSR-PCR稳定可靠的反应体系。结果建立了可用于三角叶黄连ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系:25μLPCR反应体系中,内含10×PCR Buffer 2.5μL,1.5mmol/L Mg2+,200μmol/L dNTP,0.3μmol/L引物,40ng模板,1.0U Taq DNA聚合酶。...

• 单位
  生命科学学院; 三峡库区生态环境教育部重点实验室; 西南大学