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摘要
目的:探讨前列腺素E2特异性受体激动剂4(EP4A)促进人CD34~+细胞体外增殖的可能信号途径。方法:收集中山一院血液科20例健康供者经G-CSF动员后的外周血造血干细胞采集物。应用免疫磁珠法分选出人CD34~+细胞,应用CCK8法明确EP4A促进人CD34~+细胞体外增殖的最佳条件(最佳浓度和最佳作用时间);在此条件下EP4A作用于人CD34~+细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测β-catenin mRNA水平的变化、Western blot检测β-catenin和P-GSK-3β蛋白表达情况。结果:EP4A 10μmol/L、在培养72 h能明显促进人CD34~+细胞体外增殖,增殖率为对照组的1.36倍(P=0.002)。最佳条件EP4A作用于人CD34~+细胞后,β-catenin mRNA及其蛋白的表达增高,GSK-3β蛋白的磷酸化增加,而这些作用均可被相应的抑制剂(EP4AA)所拮抗。结论:EP4A可通过激活Wnt/β-catenin信号途径促进人CD34~+细胞体外增殖。
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