地高辛标记引物酶显色法检测HBV基因多态性及应用

作者：马达; 王惠民; 张芹; 王万相; 蒋玲; 郭乃洲; 张冬雷; 赵建龙; 孙悦

来源：临床检验杂志, 2004, (06): 408-411.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2004.06.002

• DNA芯片
• 乙型肝炎病毒
• 基因多态性
• 地高辛 DNA chip
• hepatitis B virus (HBV)
• gene polymorphism
• digoxin

目的　建立地高辛标记引物酶显色法 ,用于DNA芯片检测HBV基因多态性 ,并对实验条件进行优化。方法　用地高辛标记引物进行HBVDNA前C/C区和P区双重PCR ,制备含地高辛标记的DNA样品目的片段 ,并将目的片段杂交于含HBVDNA核苷酸序列野生型及突变型探针的DNA芯片上 ,用抗地高辛抗体 碱性磷酸酶进行显色 ,并转印于尼龙膜上 ,最后用光学扫描仪读取结果。结果　通过一次杂交反应同时获取HBVDNA前C/C区 (1896、1814 )、BCP区 (176 2、176 4 )和P区 (5 5 2 )位点的信息。杂交温度与时间为 4 2℃ 1h、酶作用和显色时间分别为 30min和 4 5m...

• 单位
  中国科学院上海微系统与信息技术研究所; 南通大学; 盐城市第一人民医院