白藜芦醇抑制白血病K562细胞增殖机制的探讨

作者：张海燕; 都镇先; 孟欣; 邓娓娓; 王华芹

来源：中华肿瘤防治杂志, 2012, 19(19): 1460-1463.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2012.19.001

• K562细胞
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶/代谢
• 细胞凋亡/药物作用

目的:探讨白藜芦醇(RES)抑制白血病K562细胞增殖的机制及非折叠蛋白应答(UPR)对其机制的影响。方法:选取不同浓度的RES干预K562细胞,并且用RES(100μmol/L)干预K562细胞不同时段;利用MTT法检测细胞存活率;利用流式细胞仪分析细胞周期并检测细胞凋亡率;利用蛋白质印迹法检测凋亡早期蛋白及UPR靶点蛋白表达水平;利用实时定量PCR法检测GRP78和CHOP mRNA的表达。结果:RES导致K562细胞细胞存活率明显减少,并呈剂量依赖方式;RES的生长抑制作用主要是阻断细胞周期中的G1期,G2/M期的变化较小;RES处理的K562细胞没有显著的细胞凋亡。RES可提高GRP78mRNA的表达水平,呈剂量及时效依赖方式;RES对CHOP mRNA水平也有诱导作用,但只有在RES浓度较大时(50μmol/L)或作用时间较长时(8h)才开始上调,并且上调幅度较小。蛋白质印迹分析证实RES提高UPR靶点(GRP78、GRP94、磷酸化eIF2a和剪接作用XBP-1)的蛋白表达水平。结论:RES优先诱导UPR存活分支,表明UPR参与RES抑制白血病K562细胞增殖的机制。

• 单位
  基础医学院; 中国医科大学; 中国医科大学附属第一医院