急性肺损伤大鼠肺泡上皮紧密连接时相性改变

作者：沈菊芳; 邱海波; 李家琼; 陈永铭; 李娜; 杨毅

来源：中华医学会重症医学2006年秋季全国学术研讨会.

• 急性肺损伤
• 机械通气
• 肺泡上皮

目的:观察急性肺损伤(ALI)后不同时间对肺泡上皮紧密连接(TJ)完整性的破坏及其对肺泡上皮通透性改变的影响.方法:内毒素(LPS)静脉注射复制大鼠ALI模型.25只清洁级SD大鼠随机分成5组:对照组,LPS组,LPS+机械通气2小时(LV2h)组,LPS+机械通气4小时(LV4h)组和LPS+机械通气6小时(LV6h)组.动物处死前2 h静脉注射异硫氰酸荧光素标记的白蛋白(FITC-Albumin),处死后肺泡灌洗,根据肺泡和血清中标记白蛋白的比值,即A肺泡/A血清测定肺泡上皮通透性,取肺组织作病理检查,光镜下行ALI半定量评分;测定肺组织湿/干重比(W/D)反映肺水肿程度;免疫荧光共聚焦观察肺组织TJ的形态学改变以及TJ蛋白Occludin的表达;Western Blot测定Occludin的表达.结果:(1)对照组ALI评分2.60±0.25,LPS组(8.00±0.21)显著增高(q=25.74,P＜0.05);与LV2h组(8.02±0.48)相比,LV4h组(7.20±0.40)和LV6h组(7.06±0.23)显著降低(q=3.91和q=4.58,P＜0.05).(2)对照组W/D 1.97±0.75,LPS组(5.81±0.68)显著下降(q=10.12,P＜0.05);与LV2h组相(4.20±0.53)比,LV4h组(3.68±0.65)和LV6h组(3.61±0.28)差异无显著性(P＞0.05).(3)对照组A 肺泡/A血清1.09±0.05,LPS组(1.99±0.23)显著增高(q=3.33,P＜0.05);与LV2h组(3.58±0.47)相比,LV4h组(1.87±0.57)和LV6h组(2.04±0.57)的显著降低(q=6.31和q=5.67,P＜0.05).(4)对照组动物肺组织清晰可见TJ沿肺泡上皮连续排列,荧光密度强,LPS干预各组TJ排列不规则,断断续续,呈弥散分布,且荧光密度明显下降,LV2h组尤为明显.(5)免疫荧光测定对照组的Occludin的表达69.2±9.9,LPS组(45.4±6.3)显著降低(q=6.39,P＜0.05);与LV2h组(18.0±3.3)相比,LV4h组(30.8±4.2)和LV6h组(29.2±2.6)显著增加(q=3.44和q=3.01,P＜0.05).Western blot测定对照组Occludin的表达0.90±0.42,LPS组(0.69±0.57)显著下降(q=4.29,P＜0.05);与LV2h组(0.27±0.69)相比,LV4h组(0.44±0.83)和LV6h组(0.43±0.12)则显著升高(q=3.44和q=3.40,P＜0.05).结论:ALI后机械通气2 h,肺泡上皮TJ的破坏最为严重,肺泡上皮通透性也最高.

• 单位
  东南大学; 东南大学附属中大医院