EM18-GST原核表达载体的构建及空间结构的生物信息学分析

作者:周晓涛; 周文涛; 杨晨晨; 张蓓; 刘献飞; 王俨; 张传山; 吕国栋; 林仁勇
来源:中国病原生物学杂志, 2013, (10): 899-902.
DOI:10.13350/j.cjpb.2013.10.016

摘要

目的构建GST-EM18原核表达质粒,优化EM18-GST重组蛋白诱导表达条件,通过生物信息学预测EM18蛋白的空间结构。方法以pMD18-T/Em18为模板,扩增EM18基因的CDS区,构建pGEX-3X-EM18,设计不同诱导表达条件表达EM18-GST蛋白。通过各种在线网站对EM18蛋白空间结构进行生物信息学预测。结果成功构建GST-EM18原核表达质粒,以1mmol/LIPTG于37℃诱导4h,蛋白表达较好;生物信息学预测EM18蛋白N端为无规卷曲,之后紧连两个α螺旋,C末端为无规卷曲和较短的片层结构。结论成功构建了GST-EM18原核表达质粒,表达的EM18蛋白含有无规则卷曲,可能是...

  • 单位
    新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院; 新疆医科大学第五附属医院

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