PTD-Foxp3融合蛋白的表达、纯化及其生物学功能初步研究

作者:黄莉莉; 邵启祥; 张慧; 许逊; 宗杨勇; 陈述; 申卫红; 田小雷; 彭鑫; 王胜军; 许化溪
来源:江苏大学学报(医学版), 2007, (03): 188-192+196.
DOI:10.13312/j.issn.1671-7783.2007.03.002

摘要

目的:构建带HIV-1 TAT转录因子的穿膜序列(Protein transduction domain,PTD)的pET28a-PTD-Foxp3原核表达载体,表达纯化PTD-Foxp3融合蛋白,并研究其生物学作用。方法:利用基因重组技术构建pET28a-PTD-Foxp3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中表达融合蛋白,经Ni2+分离柱纯化pET28a-PTD-Foxp3融合蛋白。流式细胞术检测融合蛋白穿越细胞膜进入小鼠T淋巴细胞瘤株EL-4细胞中的能力,并通过混合淋巴细胞反应初步分析融合蛋白抑制T细胞活化增殖的生物学作用。结果:成功地构建了pET28a-PTD-Fo...

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