应用流式细胞术鉴定结核分枝杆菌利福平敏感性的研究

作者：谢贝; 孟繁荣; 李华; 刘志辉; 王伟亮; 王楠; 邓丽; 吴玲; 雷杰; 杨瑜; 牛群; 张言斌^*

来源：国际医药卫生导报, 2019, (11): 1692-1697.

• 流式细胞术
• 结核分枝杆菌
• 利福平
• 碘化丙啶
• 荧光素双醋酸酯

目的 探究流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)利福平(Rifampicin,RFP)药物敏感性的可行性。方法 对结核分枝杆菌临床分离全敏株与耐RFP株菌悬液用12.5 μg/ml、25.0 μg/ml、50.0 μg/ml、100.0 μg/ml的RFP液作用3 d、7 d或10 d后,经荧光素双醋酸酯(Fluorescein diacetae,FDA)染色；1.56 μg/ml、6.25 μg/ml、25.00 μg/ml、100.00 μg/ml的RFP液作用1 d、3 d、7 d后经碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色,采用FCM检测其平均荧光强度(Mean fluorescence intensity,MFI)值,并计算其敏感指数(实验管MFI/对照管MFI),依据受试者工作曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)统计各药物浓度及处理时间下FCM FDA鉴定MTB RFP敏感性的诊断性能,选定基于FDA和PI的FCM法鉴别MTB RFP敏感性的最佳条件与区分MTB RFP敏感或耐药的敏感指数界值。分别对95株和78株MTB临床分离株进行基于FDA和PI的FCM药物敏感性测定并与比例法药敏实验进行比较。结果 基于FDA的FCM检测MTB RFP敏感性的最佳条件是12.5 μg/ml的RFP处理7 d,敏感指数界值为0.75,检测结果准确度为88.4%,灵敏度为90.2%,特异度为87.0%,与比例法比较差异无统计学意义(χ2=0.364,P=0.549)。基于PI的FCM检测,MTB RFP敏感性的最佳条件是1.56 μg/ml的RFP处理1 d,敏感指数界值为1.12,检测结果准确度为84.6%,灵敏度为85.7%,特异度为83.7%,与比例法比较差异无统计学意义(χ2=0.083,P=0.774 5)。结论 基于FDA或PI的FCM法均可应用于MTB临床分离株的RFP敏感性检测。

• 单位
  广州市胸科医院