多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

作者：张爱芹; 郭东春; 刘家森; 原冬伟; 姜骞; 林欢; 崔玉东; 曲连东

来源：动物医学进展, 2013, (01): 6-10.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2013.01.002

• 多杀性巴氏杆菌
• purF基因
• 原核表达
• 多克隆抗体 Pasteurella multocida
• purF gene
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody

为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体,通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51-17株purF基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,构建重组表达质粒pHT-PurF,转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明,获得重组蛋白分子质量约56.5ku,主要以包涵体形式存在;Western blot检测表明,表达的蛋白可与多杀性巴氏杆菌制备的高免血清发生特异性反应。将制备的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA检测血清抗体效价,结果显示制备的多克隆抗体滴度达到1∶128 000,Western blot表明可与多杀性巴...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 黑龙江八一农垦大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 动物科技学院