脱细胞猪小肠黏膜下层基质中纤维连接蛋白定量检测方法研究

作者：陈毅; 夏磊磊; 张扬; 高建萍; 李赛娜; 雷雄心; 李勇超; 张贵锋; 赵博

来源：生物学杂志, 2018, 35(02): 97-100.

• 猪小肠黏膜下层
• 脱细胞基质
• 纤维连接蛋白
• 特征肽段
• 液质联用技术

采用分批次酶解和高效液相色谱与质谱分析联用技术(HPLC-MS)对脱细胞猪小肠黏膜下层(p-SIS)基质材料中纤维连接蛋白(FN)进行了定量检测。分批次酶解消除了静态酶解时间长、酶解效率低的不足,将酶解时间从96 h缩短至6 h,降解率可以达到95%以上。采用胰蛋白酶特异性酶解得到猪源FN的一个特征多肽为SSPVVIDASTAIDAPSNLR,HPLC-MS对这一特征肽段定量检测结果表明,VIDASISTM和Biodesign两种脱细胞材料中FN的含量分别为0.43%和0.17%。方法学实验证明该方法精确度较高(RSD为1.31%)。结果表明基于质谱的分析技术可有效检测脱细胞基质中FN含量。

• 单位
  生化工程国家重点实验室; 河南科技学院; 中国科学院过程工程研究所