柯萨奇病毒A10荧光定量PCR检测方法的建立

作者：沈萍

来源：中国卫生检验杂志, 2018, 28(01): 50-52.

• 荧光定量PCR
• 手足口病
• 柯萨奇病毒A10

目的建立一种检测柯萨奇病毒A10的荧光定量PCR方法。方法从Gen Bank上下载柯萨奇病毒A10 VP1基因序列并进行同源性分析,选取相对保守的区域设计引物和探针,建立和优化柯萨奇病毒A10荧光定量PCR检测反应体系,并对质粒标准品和临床样本进行检测,评估其特异性和灵敏度。结果优化的引物探针浓度分别为0.5μmol/L和0.2μmol/L,退火/延伸温度为58℃。建立的柯萨奇病毒A10荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,仅质粒标准品和柯萨奇病毒A10阳性临床样本能获得S形扩增曲线,其他临床样本未见任何扩增,而且灵敏度高。probit回归分析估测其检测下限为3.82拷贝/μl(95%置信区间)。结论建立的荧光定量PCR方法能准确检测出柯萨奇病毒A10,可用于临床样本柯萨奇病毒A10的检测。