西达本胺对小鼠三阴性乳腺癌4T-1细胞增殖及上皮间质转化的影响

作者：任雪; 陈倩影; 张浩; 李银芳; 杨盛力; 杜志勇; 曹春雨

来源：中国新药杂志, 2021, 30(23): 2215-2224.

DOI：10.3969/j.issn.1003-3734.2021.23.015

• 西达本胺
• 组蛋白去乙酰化酶5
• 三阴性乳腺癌
• 上皮间质转化
• 肿瘤转移

目的:探索组蛋白去乙酰化酶抑制剂西达本胺（chidamide）对三阴性小鼠乳腺癌4T-1细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）的影响。方法:CCK-8法分析西达本胺对4T-1细胞增殖的影响;流式细胞术检测西达本胺对4T-1细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响;Western Blot检测细胞内组蛋白去乙酰化酶5（histone deacetylase 5, HDAC5）、赖氨酸特异性去甲基化酶1（lysine-specifc demethylase 1,LSD1）以及EMT相关蛋白E-cadherin、波形蛋白（vimentin）、MMP-9和MMP-2的表达;Transwell法结合结晶紫染色分析西达本胺对4T-1细胞迁移、侵袭的影响;HE染色法观察肿瘤组织的肺部转移情况及西达本胺对小鼠的毒性作用;ELISA法分析西达本胺对小鼠免疫系统的影响。结果:CCK-8法检测结果显示西达本胺具有显著抑制4T-1细胞增殖的能力,其24 h的IC50值为43.42μmol·L-1。西达本胺可诱导4T-1细胞发生G2/M期阻滞以及细胞凋亡。同时发现,西达本胺显著下调4T-1细胞中HDAC5的mRNA和蛋白表达,但只下调LSD1的蛋白表达;此外,4T-1细胞内EMT相关因子E-cadherin, vimentin, MMP-9和MMP-2的表达显著下调。Transwell实验发现,西达本胺显著抑制4T-1细胞的迁移和侵袭。体内实验表明,10 mg·kg-1西达本胺抑制了4T-1细胞在荷瘤小鼠体内的增殖和肺转移,未对小鼠体重及心脏、肝脏、肾脏组织形态产生显著影响。结论:西达本胺能够下调HDAC5,LSD1和EMT相关蛋白E-cadherin, vimentin, MMP-9和MMP-2的表达,并抑制4T-1细胞体内、体外的增殖与迁移,提示西达本胺具有用于临床抗三阴性乳腺癌治疗的潜在价值。

• 单位
  三峡大学; 华中科技大学同济医学院附属协和医院