摘要
目的 研究过表达和沉默AEG-1基因对肝癌细胞生长的影响,以及AEG-1基因在调节肝癌细胞定向肺转移中的作用。方法 分别以携带过表达AEG-1序列及对照基因序列的慢病毒(lentivirus)转染SMMC-7721肝癌细胞株(SMMC-7721-AEG-1-L;SMMC-7721-control-L);以携带shRNA AEG-1及对照shRNA质粒(plasmid)转染SMMC-7721细胞株(SMMC-7721-shAEG-1-P;SMMC-7721-control-P);使用实时定量PCR和Westen blot检测AEG-1的表达;随后使用荧光素酶基因慢病毒包装颗粒转染上述4种稳定转染细胞株。使用上述细胞株分别建立3种裸鼠肝癌模型:皮下移植瘤模型,原位移植瘤模型和血行播散模型;每种细胞株每一模型5只Balb-c裸鼠,共60只。建立皮下移植瘤模型,观测肿瘤的生长情况并绘制肝细胞肿瘤生长曲线;建立肝癌原位移植瘤和血行播散模型,采用生物发光活体成像技术及组织病理学方法监测造模成功率及肿瘤在肝内、肝外转移情况。结果 通过肝癌皮下移植瘤模型可观察到AEG-1过表达组肿瘤体积显著高于对照组,且裸鼠肝脏组织出现弥漫性侵袭转移灶;在肝癌原位移植瘤和血行播散模型中可观察到AEG-1过表达/沉默可以导致肝癌细胞肝内转移、肺转移率和转移灶数量显著增高/降低。结论 过表达AEG-1基因可促进肝癌细胞生长以及定向肺转移,沉默AEG-1基因抑制肝癌细胞生长及定向肺转移。
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单位河南省人民医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院