摘要

目的 探讨氙气后处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)后自噬的影响及其与苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路的关系。方法 30只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓缺血再灌注组(I/R组)和氙气后处理组(Xe组),每组10只。后两组通过夹闭腹主动脉85 min,再灌注4 h建立大鼠SCIRI模型。于再灌注1 h时,Xe组经呼吸机吸入50%氙气+50%氧气混合气1 h。其余两组吸入50%氮气+50%氧气混合气1 h。再灌注4 h时,对大鼠行BBB评分和斜板试验后,收集L3-5脊髓,Nissl染色计数正常神经元数量,Western blotting检测脊髓组织中Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、自噬蛋白[p62、Beclin 1、微管相关蛋白1轻链3 (LC3)Ⅰ和LC3Ⅱ]的表达,逆转录实时定量聚合酶链反应检测脊髓组织中p62、Beclin 1和LC3Ⅱ mRNA的表达。结果 与Sham组相比,I/R组后肢BBB评分明显降低(P <0.01),斜板试验最大倾斜度明显减小(P <0.01),正常神经元数量明显减少(P <0.01);p-Akt/Akt比值明显降低(P <0.01);Beclin 1蛋白表达明显上调(P <0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高(P <0.01),p62蛋白表达下调,且Beclin 1 mRNA和LC3Ⅱ mRNA的含量增加,p62 mRNA含量明显减少(P <0.01)。与I/R组相比,Xe组后肢BBB评分明显升高(P <0.01),斜板试验最大倾斜度明显增大(P <0.01),正常神经元数量明显增加(P <0.01);p-Akt蛋白表达上调,p-Akt/Akt比值明显升高(P <0.01);Beclin 1蛋白的表达明显下调(P <0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低(P <0.01),p62蛋白的表达明显上调(P <0.01),p62 mRNA的含量明显增加(P <0.01),LC3Ⅱ mRNA的含量减少(P <0.05)。结论 氙气后处理可以减轻SCIRI,可能与激活Akt通路,抑制自噬水平有关。

  • 单位
    首都医科大学附属北京友谊医院