糖氧剥夺再灌注对SH-SY5Y细胞焦亡的影响

作者：黄丽琴; 余樱; 熊婧; 赵雪清; 孟兰霞; 张振涛; 张兆辉^*

来源：卒中与神经疾病, 2021, 28(03): 253-281.

DOI：10.3969/j.issn.1007-0478.2021.03.001

• 糖氧剥夺再灌注
• SH-SY5Y细胞
• 细胞焦亡
• 缺血再灌注损伤

目的探讨细胞焦亡在糖氧剥夺诱导的人神经母细胞瘤细胞(Human neuroblastoma cells, SH-SY5Y)损伤中的作用。方法用不同糖氧剥夺时间(0、3、6、12 h)处理SH-SY5Y细胞,然后进行再灌注24 h; Hoechst33342/碘化丙啶(Propidine iodide, PI)染色试剂盒观察细胞膜破裂情况;原位末端标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL)/天冬氨酰特异性半胱氨酰蛋白酶-1(Cysteinyl aspartate specific proteinase 1,Caspase-1)共染检测细胞焦亡;蛋白免疫印迹法检测焦亡相关指标[核苷酸结合寡聚化结构导致域样受体蛋白3(Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、Caspase-1、Pro-caspase-1、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β),Pro-IL-1β]的表达水平;使用Caspase-1抑制剂(Belnacasan, VX-765)处理糖氧剥夺/再灌注细胞模型,观察其对细胞焦亡的影响。结果糖氧剥夺再灌注处理呈时间依赖诱导SH-SY5Y细胞损伤,并诱导细胞焦亡,焦亡相关指标(NLRP 3,Caspase-1,IL-1β)表达水平升高。VX-765可减轻糖氧剥夺再灌注诱导的SH-SY5Y细胞焦亡,降低焦亡相关指标(Caspase-1,Pro-IL-1β,IL-1β)的表达水平。结论细胞焦亡在糖氧剥夺再灌注诱导的SH-SY5Y细胞损伤中起到重要作用。

• 单位
  神经内科; 武汉大学人民医院