摘要

为探究锚定蛋白Z(midcell anchored protein Z, MapZ)皮下免疫小鼠后对肺炎链球菌感染模型的免疫保护作用,通过大肠埃希菌原核表达系统表达MapZ后用Ni柱纯化并去除LPS,经皮下注射免疫C57BL/6小鼠制备MapZ特异性抗血清。通过ELISA和Western blotting分析MapZ抗血清和6种临床常见血清型肺炎链球菌的结合能力及其特异性;建立细胞模型,进一步评价MapZ抗血清的调理吞噬和抗黏附作用。将C57BL/6小鼠随机分为PBS组、MapZ组及MapZ+铝佐剂组,构建肺炎链球菌致死性模型,评估MapZ皮下免疫的保护效果。结果显示,实验成功制备并获得目的蛋白MapZ。Western blotting和ELISA检测结果显示,MapZ抗血清能够特异性识别肺炎链球菌不同血清型中MapZ蛋白,并且相较于正常血清,具有较强的结合能力(均P<0.05);同时,MapZ抗血清能够促进小鼠腹腔巨噬细胞对肺炎链球菌D39的吞噬作用(P<0.01),抑制肺炎链球菌19F对A549细胞的黏附(均P<0.05)。在肺炎链球菌致死性感染模型中,D39鼻腔攻毒后,免疫了MapZ及铝佐剂的小鼠相较于MapZ组及PBS组,生存率显著提高(P<0.05,P<0.01)。由此,MapZ是一种有潜力的肺炎链球菌候选疫苗,经皮下途径免疫小鼠后,能有效提高其感染致死性肺炎链球菌后的生存率。

  • 单位
    河南省人民医院