基于戊型肝炎病毒中和表位HEV-p179的靶细胞的构建及应用

作者：杨书才; 王春玲; 吴永锋; 王智; 浦春

来源：临床检验杂志, 2012, (08): 599-601.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2012.08.004

• 戊型肝炎病毒
• 基因疫苗
• 靶细胞
• 细胞毒性T淋巴细胞杀伤

目的以HEV-p179编码基因为目的片段,构建并筛选戊型肝炎病毒(HEV)的靶细胞,评估HEV疫苗的细胞免疫活性。方法将p179编码基因克隆入pIRES质粒中,构建pIRES-179质粒;将pIRES-179重组质粒转染Sp2/0细胞,用G418压力筛选靶细胞;用间接免疫荧光法和western blot检测靶细胞中目的蛋白p179的表达;用HEV蛋白和基因疫苗免疫BALB/c小鼠,第6周分离小鼠脾淋巴细胞作为效应细胞,用MTT法对细胞进行细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤实验。结果成功构建重组质粒pIRES-179,转染Sp2/0细胞后,经G418的压力筛选,在800μg/mL筛选到单克隆细胞;...

• 单位
  皖南医学院; 东南大学附属中大医院