His-tag对胆固醇氧化酶基因在大肠杆菌中表达的影响

作者：程晨; 辛瑜; 张玲; 王武; 杨海麟

来源：工业微生物, 2012, (05): 29-34.

• 组氨酸标签
• 胆固醇氧化酶
• 大肠杆菌 His-tag
• cholesterol oxidase
• Escherichia coli

为考察组氨酸标签(His-tag)对Brevibacterium sp.DGCDC-82中胆固醇氧化酶基因(Cho-A_b)在大肠杆菌中表达的影响,将PCR扩增后得到的结构基因与pET28a(+)连接,构建重组质粒pETChoA_b(不带His-tag),pETChoA_bn(His-tag位于N端)和pETChoA_bc(His-tag位于C端)并在大肠杆菌中进行表达。对重组酶进行酶活检测,结果表明His-tag位于ChoA_6的C端和N端,COD单位体积酶活由未带标签时的1.72 U/mL分别提高到4.03 U/mL和11.36 U/mL。利用软件QuantityOne对SDS-PAGE电...

• 单位
  江南大学