新型冠状病毒S1蛋白的表达及活性鉴定

作者：汪巧菊; 胡雨萌; 温亚亚; 宋丽; 孟闯; 潘志明^*; 焦新安

来源：生物技术通报, 2022, 38(03): 157-163.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-1076

• SARS-CoV-2
• S1蛋白
• 原核表达
• 生物活性鉴定

旨在获得具有免疫活性的SARS-CoV-2 S1蛋白，为COVID-19的免疫预防及临床诊断提供较好的候选抗原。该研究利用PCR技术扩增出刺突蛋白(Spike，S)的S1亚基序列，通过同源重组法将目的片段克隆至冷休克表达载体pCold I，转化至大肠杆菌BL21感受态细胞内诱导表达S1蛋白，经Ni2+柱亲和层析纯化后，通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定目的蛋白的表达情况。结果表明，已成功表达含His标签的S1蛋白，并且已获得浓度和纯度较高、能与S1多克隆抗体反应的目的蛋白。此外，蛋白刺激细胞的结果表明，原核表达的S1蛋白免疫原性良好，能诱导小鼠巨噬细胞上调表达多种细胞因子和趋化因子，促进RAW264.7细胞产生免疫反应。综上，该研究成功构建了pCold I-S1重组质粒，获得了SARS-CoV-2的良好候选抗原S1蛋白。

• 单位
  江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 扬州大学