pcDNA3-MAGE-1真核表达载体的构建及其在Hepa1-6细胞中的稳定表达

作者：杨广民; 齐亚灵; 李首庆; 马寅芙; 谭岩; 时阳

来源：吉林大学学报(医学版), 2010, (01): 49-53.

DOI：10.13481/j.1671-587x.2010.01.002

• MAGE-1
• 真核表达载体
• 基因转染
• 免疫疗法 MAGE-1
• eukaryotic expression vector
• gene transfection
• immunotherapy

目的:构建真核表达载体,并在小鼠肝癌Hepa1-6细胞中稳定表达,观察转染细胞的增殖能力和致瘤能力。方法:用PCR方法扩增SMMC-7721人肝癌细胞株MAGE-1全长序列,连接到真核表达载体pcDNA3中,构建真核表达pcDNA3-MAGE-1,脂质体法转染小鼠Hepa1-6细胞。G418筛选阳性克隆(Hepa1-6-MAGE-1),用RT-PCR和Western blotting检测阳性克隆中mRNA和蛋白质的表达;MTT法检测Hepa1-6细胞和Hepa1-6-MAGE-1细胞生长和增殖的变化;分别以Hepa1-6细胞和Hepa1-6-MAGE-1细胞接种于C57BL/6j小鼠右侧背部皮...

• 单位
  佳木斯大学; 吉林省人民医院; 吉林大学第一医院