基于FKN/CX3CR1信号通路的壮骨止痛解郁方抗类风湿性关节炎伴发抑郁症的作用机制研究

作者：刘检; 蔺晓源; 赵洪庆; 杨蕙; 周梓洋; 刘平安; 王宇红

来源：中国中医药信息杂志, 2022, 1-7.

DOI：10.19879/j.cnki.1005-5304.202203702

• 壮骨止痛解郁方
• 类风湿性关节炎伴发抑郁症
• FKN
• CX3CR1
• 突触可塑性

目的 基于FKN/CX3CR1信号通路研究壮骨止痛解郁方抗类风湿性关节炎伴发抑郁症（RAD）的作用机制。方法 诱导滑膜细胞炎症模型并建立脑微血管内皮细胞、小胶质细胞及海马神经元共培养体系，将细胞分为正常组、模型组、CX3CR1阻断剂组和壮骨止痛解郁方组，分别予相应处理。采用细胞成像分析系统观察滑膜细胞、脑微血管内皮细胞、小胶质细胞及海马神经元形态变化；ELISA检测滑膜细胞上清液肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、类风湿因子（RF）、趋化因子Fractalkine(FKN)含量；电阻仪测量跨内皮细胞电阻（TEER）；免疫荧光检测脑微血管内皮细胞闭合蛋白（Occludin）、闭锁小带蛋白1(ZO-1)，小胶质细胞趋化因子C-X3-C-基元受体1(CX3CR1)、腺苷A2A受体（A_(2A)R），海马神经元谷氨酸受体2A(NR2A)、谷氨酸受体2B(NR2B)蛋白表达；尼氏染色观察海马神经元突触可塑性变化。结果 与正常组比较，模型组滑膜细胞、脑微血管内皮细胞、小胶质细胞及海马神经元明显损伤；滑膜细胞上清液TNF-α、RF、FKN含量明显增加（P<0.01,P<0.05）；脑微血管内皮细胞TEER明显减少（P<0.01）,Occludin、ZO-1蛋白表达明显降低（P<0.01）；小胶质细胞CX3CR1、A_(2A)R蛋白表达明显升高（P<0.01）；海马神经元NR2A、NR2B蛋白表达明显升高（P<0.05,P<0.01），尼氏小体、树突和树突棘分支数量减少，海马神经元网络明显断裂。与模型组比较，壮骨止痛解郁方组滑膜细胞、脑微血管内皮细胞、小胶质细胞及海马神经元损伤均有所减轻；滑膜细胞上清液TNF-α、RF、FKN含量明显减少（P<0.01,P<0.05）；脑微血管内皮细胞TEER明显增加（P<0.01）,Occludin、ZO-1蛋白表达明显升高（P<0.01）；小胶质细胞CX3CR1、A_(2A)R蛋白表达明显降低（P<0.01,P<0.05）；海马神经元NR2A、NR2B蛋白表达明显降低（P<0.01），海马神经元尼氏小体、树突和树突棘分支数量减少及神经网络断裂情况明显改善。结论 壮骨止痛解郁方对体外模拟的RAD具有保护作用，其机制与保护脑微血管屏障，抑制小胶质细胞激活，减轻FKN/CX3CR1信号通路介导的突触可塑性损伤有关。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院