高密度悬浮转染方式高效获得重组杆状病毒

作者：尹坤; 王同燕; 宋欢欢; 白露露; 李胜强; 谭菲菲; 田克恭^*

来源：畜牧与兽医, 2021, 53(08): 74-78.

• 重组杆状病毒
• 高密度悬浮转染
• 贴壁转染
• 产业化生产

为了提高低代次重组杆状病毒的病毒滴度和获得足量低代次种子批,以最大程度满足产业化生产的需求,本研究以表达猪细小病毒(PPV)衣壳蛋白VP2的重组杆状病毒质粒(Bacmid)为研究对象,分别转染贴壁Sf9细胞和高密度悬浮ExpiSf9细胞。通过重组杆状病毒滴度测定、SDS-PAGE、Western blot以及血凝效价测定等方法,对获得的重组杆状病毒滴度和VP2蛋白表达量进行评价。结果表明,高密度悬浮转染获得的P0代重组病毒滴度、VP2蛋白表达水平和血凝效价均要高于贴壁转染方式,同时高密度悬浮转染可获得足量的P0代重组杆状病毒种子批,可为后续外源蛋白表达提供足量同质的低代次毒种,有效解决重组杆状病毒代次比较窄的问题,为后续重组杆状病毒相关产品的产业化生产奠定研究基础。

• 单位
  普莱柯生物工程股份有限公司