细胞因子bFGF和NF-κB在腰椎黄韧带肥厚中的表达及意义

作者：林伟文; 凌华军^*; 钟思龙; 罗鹏刚; 吴增志; 夏雄超; 赖茂松; 熊浩

来源：海南医学, 2019, 30(07): 824-828.

• 成纤维细胞生长因子
• 核转录因子kappaB
• 黄韧带肥厚
• 腰椎
• 免疫荧光

目的了解成纤维细胞生长因子(bFGF)和核转录因子kappaB (NF-κB)的表达水平,并探讨其在腰椎黄韧带肥厚中的作用机制,为临床治疗提供理论基础。方法选取佛山市高明区人民医院骨科2017年1月至2018年6月收治的15例影像学显示黄韧带厚度符合相应分组的临床标本,其中对照组(下腰椎骨折需行后路椎板及黄韧带切除术或反复盘源性腰痛行固定术黄韧带切除患者) 5例,突出组(单纯腰椎间盘突出症患者行黄韧带切除术患者) 5例,腰椎管狭窄组(黄韧带肥厚型腰椎管狭窄行黄韧带切除患者) 5例,对其组织进行培养,分离出成纤维细胞通过CCK8检测其增殖活性。使用ELISA试剂盒检测培养基上清中细胞因子浓度。将培养基上清加入巨噬细胞中通过实时荧光定量PCR (PT-qPCR)及免疫荧光检测巨噬细胞活化情况。结果对照组、突出组、腰椎管狭窄组患者黄韧带厚度分别为(2.26±0.31) mm、(3.52±0.45) mm、(4.56±0.51) mm,腰椎管狭窄组患者黄韧带较对照组及突出组肥厚,差异均有统计学意义(P<0.05);3 d和7 d成纤维细胞密度及成纤维细胞增殖CCK8结果显示,椎管狭窄组的细胞增殖速度较其他两组均明显增快,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组、突出组、腰椎管狭窄组成纤维细胞上清中bFGF细胞因子浓度分别为(0.72±0.04) ng/mL、(0.81±0.06) ng/mL、(1.16±0.15) ng/mL,培养基上清中NF-κB浓度分别为(0.81±0.07) ng/mL、(1.09±0.14) ng/mL、(1.27±0.13) ng/mL,腰椎管狭窄组3 d后的细胞培养基中bFGF和NF-κB浓度较对照组及突出组均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);通过RT-qPCR及免疫荧光检测表明,加入腰椎管狭窄组成纤维细胞上清的巨噬细胞系(RAW2647)细胞高表达促炎指标iNOS、低表达抗炎指标Arg,分别与对照组及突出组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论细胞因子bFGF和NF-κB可能通过刺激成纤维细胞增生、促进巨噬细胞活化而促使黄韧带肥厚的发生与发展。

• 单位
  广东医科大学