蓝舌病病毒NS2蛋白单克隆抗体的制备及其应用

作者：李占鸿; 段莹亮; 李乐^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(03): 330-337.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0037

• 蓝舌病病毒
• NS2
• 原核表达
• 单克隆抗体
• C-ELISA

本研究旨在制备针对蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)非结构蛋白NS2的单克隆抗体,进而用于C-ELISA鉴别BTV自然感染动物与BTV灭活疫苗免疫动物。通过原核表达BTV NS2蛋白的高保守多肽(1～228 aa)来制备抗原,并通过免疫BALB/c小鼠制备抗BTV NS2蛋白的单克隆抗体,结果,获得1株分泌单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞,命名为BTV-2A4。鉴定结果显示,该单克隆抗体的亚类/亚型为IgG1/κ;其抗原表位在NS2蛋白的91～138 aa区间;能特异性地与1～24型BTV的NS2蛋白反应;可应用于Western-blot、间接免疫荧光、间接ELISA及C-ELISA技术。C-ELISA应用的试验数据表明,BTV疫苗免疫动物及未被BTV感染动物的血清中检测不到NS2抗体,而BTV感染动物的血清中大多可被检出NS2抗体。

• 单位
  云南省畜牧兽医科学院