破骨细胞外泌体miR-183-5p靶向程序性细胞死亡因子4促进肺腺癌细胞增殖及侵袭

作者：王厚磊; 王会仁^*

来源：中国临床医学, 2023, 30(06): 959-964.

• 破骨细胞
• 外泌体
• miR-183-5p
• 程序性细胞死亡因子4
• 肺腺癌
• 骨转移

目的 探讨破骨细胞来源外泌体中miR-183-5p对肺腺癌细胞侵袭和增殖的影响及其可能的机制。方法 采用RAW264.7细胞诱导分化破骨细胞并提取外泌体，通过透射电子显微镜及激光粒度仪进行鉴定。将外泌体与肺腺癌细胞A549细胞共培养，采用qRT-PCR检测A549细胞中miR-183-5p表达水平。采用划痕实验和Transwell侵袭实验检测miR-183-5p对A549细胞迁移和侵袭能力的影响；采用CCK-8检测共培养A549细胞增殖活性，AnnexinⅤ/PI染色法检测共培养A549细胞凋亡率。采用Western印迹法检测共培养A549细胞中程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1, CCND1)和细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4, CDK4)相对表达水平。结果 外泌体呈边缘透亮清晰的椭圆形囊泡状结构，粒径30～200 nm；荧光探针发现外泌体能较快被A549摄取。共培养后A549细胞中miR-183-5p表达水平显著升高（P<0.01）。划痕实验和Transwell实验显示，共培养72 h时A549细胞的迁移和侵袭能力高于共培养24 h时（P<0.01）;CCK-8实验、AnnexinⅤ/PI染色法显示，共培养A549细胞活性高于对照组（P<0.01）、细胞凋亡率低于对照组（P<0.05）。Western印迹法显示，A549细胞中miR-183-5p过表达后，PDCD4表达降低，CCND1、CDK4表达增加（P<0.05）。结论 破骨细胞来源外泌体与A549细胞共培养可提高细胞中miR-183-5p的表达；miR-183-5p可能通过靶向抑制PDCD4表达等促进肺腺癌细胞侵袭、增殖和迁移能力。

• 单位
  复旦大学附属中山医院