摘要
研究SlMYB96在抗寒中的作用,为研究番茄的抗寒分子机制及选育番茄抗寒品种提供理论依据。以番茄cDNA为模板克隆SlMYB96,利用生物信息软件分析该基因的理化性质,利用实时荧光定量(RT-qPCR)技和病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing, VIGS)技术研究低温胁迫处理后SlMYB96的表达特征及其在番茄抗寒过程中的作用。结果表明,SlMYB96在番茄的根、茎、叶、花和果实中均有表达,且在花中表达水平最高;随着4℃低温处理时间的增加,SlMYB96的表达量升高,其中在低温处理3 h时表达量达到最大。借助TRV病毒介导的基因沉默技术将SlMYB96沉默,对野生型组(WT)、空载组(CK)以及基因瞬时沉默组(pTRV-MYB96)3组不同类型番茄植株进行低温胁迫后,外观性状结果显示,在4℃低温处理5 d后,与野生型组(WT)、空载组(CK)相比,基因瞬时沉默组(pTRV-MYB96)植株表现出更为明显的冷害症状;生理水平鉴定结果表明,4℃低温处理番茄幼苗5 d时,基因瞬时沉默组(pTRV-MYB96)植株叶绿素、丙二醛、可溶性蛋白含量和超氧化物歧化酶活性明显变低,而可溶性糖、相对电导率、游离脯氨酸含量以及过氧化氢酶、过氧化物酶活性增加,说明基因瞬时沉默组(pTRV-MYB96)植株与野生型组(WT)、空载组(CK)相比抗寒性较低。证明SlMYB96能够响应低温胁迫,将其沉默后番茄植株抗寒性降低。
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