HPLC柱前衍生法测定蛋白粉中N-乙酰神经氨酸的含量

作者：程岁寒; 冯雪萍; 潘存锋; 张彦^*

来源：分析试验室, 2020, 39(09): 1071-1074.

DOI：10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2019.121601

• N-乙酰神经氨酸
• HPLC
• 透析袋

建立了保健食品蛋白粉中N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)含量测定的高效液相(HPLC)柱前衍生方法。利用透析袋释放Neu5Ac并除去样品中的大分子蛋白质,以邻苯二胺为衍生剂,80℃水浴衍生1 h,采用高效液相紫外检测器进行检测。采用Intersil ODS-3 C18色谱柱,流动相:乙腈-1%的四氢呋喃水溶液(含0.2%磷酸)(8:92,V:V),检测波长为227 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为50μL。Neu5Ac在2.008～20.080 mg/L范围内峰面积与测定浓度呈良好的线性关系,回归曲线为:y=-7541.5x+25303,r=0.9991,方法检出限为0.2 mg/L,Neu5Ac平均回收率为101.5%,RSD为2.7%(n=6)。室温下,Neu5Ac衍生溶液在12 h内稳定。测定3批样品中Neu5Ac的平均含量为:99.4～103.0 mg/100 g。该方法适用于富含蛋白质的保健食品中Neu5Ac的含量测定。