逆转录重组酶介导的等温扩增技术快速检测甲型H1N1流感病毒

作者：安柏霖; 郭悦; 刘丹丹; 罗君红; 葛以跃; 朱凤才; 崔仑标; 赵康辰^*

来源：病毒学报, 2023, 39(01): 45-51.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.004266

• RT-RAA
• real-time PCR
• 甲型流感病毒
• H1N1
• 等温扩增
• 快速检测

利用逆转录重组酶介导的等温扩增技术（Reverse transcription-recombinase aided amplification, RT-RAA）与RT-RAA单链荧光探针结合，建立甲型H1N1流感病毒（Influenza A virus H1N1, FLU A H1N1）的快速分子检测方法。设计RT-RAA引物和荧光探针，用于FLU A H1N1模板核酸的等温扩增和荧光检测，以评价优化方法的灵敏度与特异性；将实时荧光定量PCR(real-time PCR)作为对照方法，测试RT-RAA荧光方法对临床样本的检测效果。FLU A H1N1的RT-RAA荧光检测方法能在30 min内完成检测，灵敏度达到101拷贝/μL；特异性试验表明，其与十六种常见呼吸道传染性病毒均无交叉反应。49份临床样本检测结果和real-time PCR检测结果一致性高（Kappa=0.958），临床灵敏度为100%，临床特异性为95.2%。建立的RT-RAA荧光检测方法检测时间短，灵敏度高，特异性强，适用于FLU A H1N1的快速检测。

• 单位
  南京医科大学; 江苏省疾病预防控制中心; 南开大学; 天津国际生物医药联合研究院; 江苏省卫生