昼夜节律分子BMAL1通过调节免疫细胞毒性促进骨肉瘤的预后

作者：袁金玲; 陈新建; 廖凯; 彭虹艳; 李梨平; 张树菊^*

来源：第三军医大学学报, 2020, 42(18): 1787-1794.

DOI：10.16016/j.1000-5404.202006005

• 骨肉瘤
• 昼夜节律
• BMAL1
• 骨肉瘤预后
• 细胞毒性

目的探讨核心节律分子在骨肉瘤预后中的作用及可能机制。方法在骨肉瘤细胞中过表达节律基因BMAL1, qRT-PCR检测BMAL1基因的表达;克隆形成实验和Transwell实验检测细胞的克隆形成和侵袭能力;骨肉瘤细胞与外周血单个核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)体外共培养后,钙黄素染色法检测PBMCs对骨肉瘤细胞的直接杀伤作用,流式细胞术检测PBMCs中CD8+ T和NK细胞脱颗粒(CD107a蛋白表达)的影响。结果 BMAL1 mRNA高表达的骨肉瘤患者的生存时间明显高于低表达组(P<0.000 1)。BMAL1过表达对U2OS细胞的侵袭和克隆形成无显著影响,但相较于对照组而言,过表达BMAL1的U2OS在体外与外周血单核血细胞(PBMCs)共培养4 h,其细胞死亡明显增加[PBMCs∶U2OS细胞为5∶1时,对照组和BMAL1组分别为(73.33±0.67)%和(81.00±0.58)%,P<0.01;PBMCs∶U2OS细胞为10∶1时,对照组和BMAL1组分别为(76.67±0.33)%和(82.67±1.86)%,P<0.01]。过表达BMAL1的骨肉瘤细胞组与PBMCs共培养后,T细胞和NK细胞CD107a表达差异无统计学意义(E∶T=5∶1, CD3+ CD56- T细胞,P=0.46; CD3- CD56+ NK细胞,P=0.96; E∶T=10∶1, CD3+ CD56- T细胞,P=0.93; CD3-CD56+ NK细胞,P=0.21)。结论骨肉瘤细胞BMAL1表达水平与骨肉瘤患者预后呈正相关,其机制主要是通过增加免疫细胞对其免疫监视作用,而非通过影响骨肉瘤细胞的克隆形成能力和侵袭。

• 单位
  长沙血液中心; 中南大学湘雅三医院; 湖南省儿童医院