胎儿弯杆菌表面蛋白(SapA)基因的分段表达及其免疫原性分析

作者：赵海玲; 刘思国; 刘慧芳; 王春来; 司微; 杜艳芬; 杨金国; 林靖凯

来源：中国预防兽医学报, 2008, (11): 842-845.

• 胎儿弯杆菌
• 表面蛋白基因(SapA)
• 原核表达
• 纯化
• ELISA Campylobacter fetus
• surface layer protein gene (SapA)
• prokaryotic expression
• purify
• ELISA

应用PCR方法扩增出胎儿弯杆菌表面蛋白基因(SapA)的2个基因片段SapA-N(1398bp)和SapA-C(1422bp),采用DNA重组技术,将2个基因片段分别连接于表达载体pET32a(+),并在大肠杆菌中诱导表达(rSapA-N和rSapA-C),用金属鳌合层析的方法纯化蛋白。以Western blot检测重组蛋白的免疫学活性,ELISA试验分析2种蛋白用于胎儿弯杆菌病血清学诊断的可能性。结果表明,以可溶形式表达的2部分蛋白分子量大小约66ku,与预期大小相符。纯化的蛋白均具有良好的免疫学活性,但蛋白rSapA-N比蛋白rSapA-C的免疫学活性高,rSapA-N具有良好的胎儿弯杆菌...

• 单位
  内蒙古农业大学; 广西大学; 吉林农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所