基于网络药理学及实验验证探讨山慈菇-漏芦药对治疗乳腺癌作用机制

作者：王冰; 王玥; 朱仲康; 崔勇; 于嵩; 刘海兴; 王旭^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(01): 65-71.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211518

• 山慈菇
• 漏芦
• 网络药理学
• 乳腺癌
• 作用机制
• 药对

目的:应用网络药理学的研究方法筛选山慈菇-漏芦药对治疗乳腺癌的作用靶点及相关信号通路,通过体外实验明确其作用机制。方法:通过运用中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库检索获取山慈菇-漏芦的主要化学成分及相关作用靶点;使用GendCards筛选乳腺癌疾病的相关靶标基因;通过Venn软件筛选出药物与疾病的共同作用靶点;构建出药物-疾病的靶点网络,蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建;通过基因本体(GO)富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集对有效作用靶点进行分析;通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)实验、流式细胞术检测细胞凋亡实验、蛋白免疫印迹法(Western blot)实验进行进一步的实验验证。结果:通过筛选得到山慈菇-漏芦有效化学成分7个,有效作用靶点61个,其中作用于乳腺癌的相关靶点55个。通过GO富集分析共富集到条目832个,在生物学过程方面集中体现。KEGG通路富集分析共富集到85个条目,包括肿瘤抑制基因信号通路p53,血管内皮生长因子(VEGF)信号通路,人表皮生长因子受体(EGFR)信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路等。通过体外实验验证了山慈菇-漏芦醇提取物可抑制人乳腺癌MDAMB-231细胞增殖,并诱导细胞的凋亡,与空白组,二甲基亚砜(DMSO)组(0.1%溶剂组)相比较,给药组MDA-MB-231细胞吸光度显著降低(P<0.01),凋亡率显著增高(P<0.01),Western blot实验结果表示,与空白组和DMSO组相比较,各给药组细胞中磷酸化(p)-PI3K/PI3K,p-Akt/Akt比值均明显降低(P<0.05)。结论:山慈菇-漏芦醇提取物能有效抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并可以诱导其凋亡,作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化相关。

• 单位
  辽宁中医药大学; 沈阳体育学院