质粒shRNA体内干扰Klotho基因对窦房结通道基因表达的影响

作者：蔡盈盈; 汪汉; 田鹏; 房晨鹂; 邓珏琳

来源：中华全科医学, 2015, 13(06): 887-913.

DOI：10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.2015.06.018

• shRNA
• Klotho基因
• 窦房结
• HCN4
• HCN2

目的通过质粒shRNA体内干扰,研究Klotho基因与窦房结起搏通道相关基因HCN4及HCN2之间的关系,为病窦综合征的研究提供新思路。方法取C57BL/6J小鼠25只,分为5组,每组5只:未处理组、质粒shRNA 12 h组、质粒shRNA 24 h组、生理盐水12 h组、生理盐水24 h组。质粒shRNA组为尾静脉注射质粒shRNA50μl(1μg/μl),生理盐水组为尾静脉注射生理盐水50μl,未处理组不予任何处理。分别于注射12 h及24 h后取窦房结周围组织,行Western blotting检测各组小鼠的Klotho、HCN2、HCN4基因的蛋白表达水平。结果质粒shRNA 12 h组(0.24±0.09)的Klotho蛋白水平表达量较低,与未处理组(3.19±0.42)及生理盐水12 h组(2.34±0.41)Klotho蛋白表达量相比,差异均存在统计学意义(P值均为<0.001)。质粒shRNA 12 h组(1.55±0.89)的HCN4蛋白水平表达量与未处理组(2.56±0.54)及生理盐水12 h组(3.05±0.46)HCN4蛋白表达量相比差异均存在统计学意义(P值分别为0.015及0.001)。结论小鼠Klotho基因通过其蛋白表达可能会干扰窦房结起搏基因的蛋白表达。

• 单位
  成都医学院第一附属医院; 成都市第三人民医院