拟穴青蟹精氨酸激酶的重组表达及致敏性分析

作者：杨阳; 何欣蓉; 何少贵; 陈锦莉; 刘萌; 费丹霞; 毛海燕; 刘光明^*

来源：食品科学, 2023, 1-14.

• 拟穴青蟹
• 精氨酸激酶
• 重组蛋白
• 致敏性
• Balb/c小鼠

为比较拟穴青蟹(Scyllaparamamosain)重组精氨酸激酶(recombinantAK，rAK)和天然AK(nativeAK，nAK)的致敏性，并鉴定AK分子中的致敏优势区域，本实验首先基于AK的抗原表位分布与空间结构，将AK分子分为AK-E1(AminoAcid，AA1～92)、AK-E2(AA87～187)、AK-E3(AA172～265)和AK-E4(AA276～357) 4个片段，采用大肠杆菌原核表达系统对其进行分段表达，并分别分离纯化了nAK、rAK及AK的4个分段表达产物。用BALB/c小鼠模型评价重组蛋白的致敏性结果显示，rAK致敏小鼠血清中特异性抗体水平、脾脏淋巴细胞的Th2型细胞因子释放水平均显著升高，表明rAK可使机体致敏，但其免疫原性较nAK弱；AK的4个分段表达产物中AK-E2的免疫原性最强。同时，rAK能够刺激RBL-2H3细胞释放β-己糖苷酶，但rAK对效应细胞的刺激作用低于nAK；4个分段表达产物中AK-E2和AK-E4对效应细胞的刺激作用较强。

• 单位
  食品与生物工程学院; 厦门海洋职业技术学院; 集美大学; 厦门华厦学院