摘要
本研究建立了柱前衍生化反向高效液相色谱法(RP-HPLC)测定肽藻营养粉中游离氨基酸的方法,并确认了肽藻营养粉中的氨基酸种类以及含量。通过研究确定了高效液相色谱法的最佳条件:流动相A:醋酸钠-三乙胺缓冲液(pH 7.20±0.05),加入0.5%四氢呋喃调节峰型;流动相B:醋酸钠缓冲液(pH 7.20±0.05)-乙腈-甲醇(20:40:40),以邻苯二甲醛(OPA)和氯甲酸芴甲脂(FOMC-Cl)为衍生剂,使用Agilent Hypersil ODS色谱柱(5μm,4.0×250 mm),柱温40℃,自动在线衍生,检测波长为338 nm/262 nm。利用该方法检测出17种氨基酸,其中包含8种必需氨基酸,另外结果显示17种氨基酸均呈现良好的线性关系(r>0.9990),平均回收率为85%115%(RSD为1.15%5.23%,n=6)。10个批次样品中分别检测到至少15种游离氨基酸。表明该方法简便、准确且重复性好,适用于肽藻营养粉游离氨基酸含量测定。
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