摘要
【目的】探究碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子在草莓果实成熟过程中的功能。【方法】基于转录组测序和基因组数据库,克隆FabHLH148基因;分析其理化性质、保守结构域、预测编码的蛋白质结构、系统进化树、亚细胞定位等;采用RT-qPCR检测其在草莓中的时空表达水平,并构建过表达(over expression,OE)和RNA干扰(RNA interference,RNAi)载体,利用农杆菌介导瞬时侵染草莓果实,观察记录表型,检测FabHLH148表达水平,并测定花色素苷含量。【结果】FabHLH148基因CDS区全长687 bp,编码228个氨基酸,预测蛋白分子质量24.89 ku,理论等电点(p I)为11.65;该基因属于bHLH超家族,因其与二倍体草莓FvbHLH148序列相似度最高,所以将其命名为FabHLH148;亚细胞定位显示,FabHLH148主要定位在细胞核。RT-qPCR结果表明,FabHLH148在草莓不同组织部位均有表达,在果实中有较高表达并随果实成熟表达量显著升高。过表达FabHLH148能够促进果实着色以及花色素苷的积累,通过RNAi调低FabHLH148的表达则作用结果相反,且FabHLH148在OE组果实中表达水平显著高于对照,RNAi组果实中表达水平显著低于对照(p<0.01)。【结论】转录因子FabHLH148属于bHLH超家族,可促进草莓果实着色。
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