摘要
目的观察甲泼尼龙(MP)对高糖腹膜透析液(PDS)诱导人腹膜间皮细胞(HMPCs)纤维化相关细胞因子表达的影响。方法体外培养HPMCs,随机分为空白组(10%FBS培养液)、模型组(4.25%PDS和10%FBS培养液)和MP低、中、高剂量组(含MP浓度为0.1、0.2、0.4μg/m L的4.25%PDS和10%FBS培养液)。采用CCK-8法检测细胞存活率;MTT法检测各组细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞内ROS水平;RT-PCR法检测IL-6、α-SMA、HA的m RNA表达;Western blotting法检测核转录因子(NF-κB)、转化生长因子β(1TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、透明质酸(HA)、Smads蛋白表达。结果 MP浓度在0.032~0.256μg/m L时,HPMCs存活率升高(P<0.05);MP对HPMCs的半抑制率(IC50)为0.842μg/m L。与空白组相比,模型组增殖活性减弱(P<0.05),ROS、IL-6、NF-κB、TGF-β1、CTGF、VEGF、α-SMA、HA、p-Smad2/3、Smad7的表达增强(P均<0.05);与模型组相比,ROS在MP中、高剂量组的表达减少(P均<0.05),IL-6、NF-κB、TGF-β1、CTGF、VEGF、α-SMA、HA、p-Smad2/3、Smad7在MP三个剂量组表达下调(P均<0.05)。结论 MP通过减少高糖PDS诱导HPMCs纤维化相关细胞因子的表达,发挥抗PF的作用。
- 单位