科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
本发明涉及恶臭假单胞菌甲醛脱氢酶基因、编码蛋白及重组载体,本发 明以恶臭假单胞菌AS 1.643基因组DNA为模板,用PCR方法,分离得到 新基因fdhA,编码蛋白质甲醛脱氢酶PFDH。将fdhA克隆于表达载体 pET24b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中甲醛脱氢酶PFDH一部分以胞内可溶 的形式存在,其可溶蛋白表达量为13.7mg/L。通过镍亲和层析纯化,得到 纯度为95％以上的重组蛋白PFDH,得率11mg/L。该重组PFDH在NAD+ 存在下催化甲醛脱氢形成甲酸,最高比活可达38U/mg,对甲醛的表观Km 为0.116±0.016mM。我们将重组PFDH用在生物分析过程、CO2转化为甲 醇以及生物功能研究中。
- 单位
