人FRNK重组腺病毒的构建

作者：曹俊; 于皆平; 刘超红; 刘启胜; 齐元玲; 于红刚

来源：武汉大学学报(医学版), 2007, (03): 265-269.

DOI：10.14188/j.1671-8852.2007.03.001

• FRNK
• 基因治疗
• 腺病毒
• 载体 FRNK
• Gene Therapy
• Adenovirus
• Vector

目的:应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建人FRNK基因重组腺病毒,并在HEK293细胞中扩增制备重组病毒。方法:把人FRNK基因克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建腺病毒质粒pAdTrack-CMV-hFRNK,经PmeⅠ内切酶酶切成线性化后,采用电穿孔转化将其转化到含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中,通过卡那霉素筛选获得阳性腺病毒重组质粒。再将获得的腺病毒重组质粒转染到HEK293细胞进行包装,获得人FRNK重组腺病毒pAdhFRNK。荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。结果:经酶切和绿色荧光蛋白表达证明了hFRNK基因的重组腺病毒载...

• 单位
  中国科学院; 武汉大学人民医院; 病毒学国家重点实验室