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摘要
为实现啤酒及啤酒生产中短乳杆菌的快速筛查,建立实时荧光环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法特异性检测短乳杆菌。通过多序列分析比对,选择短乳杆菌特异性基因序列设计3套引物。经引物筛选和反应温度优化,建立快速检测短乳杆菌的实时荧光LAMP方法,并以车间关键控制位点验证方法的适用性。结果显示,1号引物组能够在等温65 ℃、30 min内完成实时荧光LAMP检测。反应特异性强、灵敏度高。对4株目标菌株和18株非目标菌株进行检测,未出现假阳性和假阴性结果;纯菌液灵敏度可达102 cfu/mL,优于同期实时荧光PCR灵敏度10倍。车间关键控制污染点检测结果与传统培养法及测序结果相符。建立的实时荧光LAMP方法将为啤酒及啤酒生产中短乳杆菌快速筛查提供有力支持。
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单位河北工程大学; 北京燕京啤酒股份有限公司; 生命科学与食品工程学院; 中国食品发酵工业研究院有限公司
