摘要
目的:探讨人脐静脉来源的间质干细胞(MSCs)的体外分离、纯化、扩增和多向分化条件。方法:无菌条件下取正常人脐静脉,1%胶原酶Ⅱ消化脐静脉细胞,以IMDM作为培养基进行培养和纯化细胞,瑞氏染色和电镜观察形态;FACS检测其免疫表型和细胞周期;体外诱导成骨细胞、脂肪细胞分化,von Kossa染色、油红O染色和RT-PCR检测骨钙蛋白、脂蛋白脂酶mRNA的表达以检测细胞向成骨、成脂肪细胞分化情况。结果:脐静脉来源的细胞呈纤维样贴壁生长,瑞氏染色和电镜观察具有MSCs特征;FACS检测结果显示,表达MSCs相关的抗原CD29、CD44、CD105,而CD31、CD13、CD34、CD45、HLA-DR为阴性;体外诱导成骨细胞、脂肪细胞分化成功。结论:人脐静脉来源的MSCs的细胞形态、生长特性、免疫表型、多向分化能力与骨髓来源的MSCs相似,可作为满足实验和临床需要的MSCs来源。
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单位华中科技大学同济医学院附属协和医院