广州管圆线虫ASP基因的克隆及原核表达

作者：郭鹏娟; 詹希美; 甘明; 李卓雅; 于彦杰; 潘智华; 张美春; 何蔼

来源：中国人兽共患病学报, 2010, (05): 471-474.

• 广州管圆线虫
• 天冬氨酸蛋白酶
• 基因克隆
• 原核表达
• 免疫性 Angiostrongylus cantonensis
• aspartic protease
• molecular cloning
• prokaryotic expression
• immunogenicity

目的对广州管圆线虫ASP基因的完整开放读码框进行克隆、表达及重组蛋白的免疫性分析。方法以广州管圆线虫幼虫cDNA文库中含有ASP基因的质粒为模板,扩增目的基因,进一步将其克隆到原核表达质粒pET-30a( )中,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Ni-IDA亲和层析纯化表达产物。免疫印迹(Western blotting)分析重组蛋白的免疫性。结果广州管圆线虫ASP基因的编码区含有366个碱基,编码121个氨基酸,相对分子量(Mt)为13398.26Da。重组质粒pET-30a( )-ASP构建成功,IPTG诱导获得可溶性表达的重组蛋白...

• 单位
  中山大学; 广州市海珠区疾病预防控制中心